引物合成儀是分子生物學實驗室的核心設(shè)備，其高效穩(wěn)定運行對實驗至關(guān)重要。最常見的三類故障是管路堵塞、閥門泄漏和合成數(shù)據(jù)異常。本文將對此進行簡要分析并提供針對性解決方案。

　　一、管路堵塞

　　這是普遍的故障，直接導致合成失敗。

　　診斷：通常伴隨柱壓異常升高、試劑輸送不暢、最終產(chǎn)量極低或無產(chǎn)物。

　　主要原因與解決方案：

　　合成柱堵塞：最常發(fā)生。因單體或堿基溶液沉淀、柱床干涸或固體顆粒引起。解決方案：立即中斷合成，用強效去阻塞溶劑（如乙腈、濃縮TCA/二氯甲烷溶液）反向或正向沖洗合成柱及上游管路。日常需確保試劑新鮮、無水，合成后充分沖洗。

　　管路或閥門微堵：特定試劑管路壓力高。由結(jié)晶或降解物引起。解決方案：執(zhí)行針對特定試劑的“Purge”清洗程序，或手動拆卸清洗相關(guān)閥塊和毛細管路。

　　二、閥門與管路泄漏

　　泄漏導致試劑計量不準、交叉污染，甚至損壞設(shè)備。

　　診斷：壓力無法建立或持續(xù)下降、反應柱周圍有液體積聚、合成產(chǎn)率低且序列中出現(xiàn)“缺失”或錯誤摻入。

　　主要原因與解決方案：

　　密封圈老化或磨損：閥門（尤其是主分配閥）的轉(zhuǎn)子密封墊或管路接頭密封圈是最常見泄漏點。解決方案：根據(jù)維護計劃定期預防性更換所有關(guān)鍵密封圈。發(fā)現(xiàn)泄漏后，立即停機，參照手冊更換對應密封部件。

　　管路連接松動或破裂：檢查各卡套接頭是否緊固，查看特氟龍毛細管有無折痕或裂縫。解決方案：重新緊固或更換損壞的管路。

　　三、合成數(shù)據(jù)異常

　　表現(xiàn)為產(chǎn)率低、純度差（特別是長鏈引物失?。珒x器無報警。

　　診斷：HPLC/質(zhì)譜分析顯示產(chǎn)物不正確、截短序列多或全長產(chǎn)率遠低于預期。

　　主要原因與解決方案：

　　試劑問題（最常見）：單體溶液降解（特別是G單體）、活化劑或氧化劑失效、乙腈含水量超標。解決方案：嚴格管理試劑，使用新鮮、高純度、無水的試劑和乙腈，定期更換干燥劑。

　　脫帽/脫保護效率低：脫帽液或最終切割/脫保護試劑（如濃氨水）濃度不足或時間設(shè)置錯誤。解決方案：確保試劑配制準確，并驗證脫保護反應程序是否充分。

　　軟件或參數(shù)錯誤：雖然罕見，但錯誤的合成序列或循環(huán)參數(shù)會導致系統(tǒng)性失敗。解決方案：每次合成前仔細核對序列文件和合成參數(shù)設(shè)置。

　　總結(jié)：預防勝于治療。建立定期預防性維護計劃（如每月清洗、每季度更換密封圈、監(jiān)控試劑有效期）并保持詳細的工作日志，是最大限度減少故障、保障引物合成成功率與質(zhì)量的有效策略。當遇到復雜問題時，應及時聯(lián)系設(shè)備工程師。