一、日常操作規(guī)范
試劑準(zhǔn)備與檢查
確保試劑瓶（如乙腈、活化劑、氧化劑）密封良好，保持氬氣壓力穩(wěn)定，防止外界空氣進(jìn)入影響合成效果。
合成前檢查試劑余量，及時(shí)更換空瓶，避免因試劑不足導(dǎo)致合成中斷。
序列輸入與參數(shù)設(shè)置
通過(guò)計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)軟件輸入目標(biāo)DNA序列，考慮密碼子偏好性、二級(jí)結(jié)構(gòu)及限制酶位點(diǎn)。
確認(rèn)合成步驟（如脫保護(hù)、耦合、封閉、氧化）是否正確，選擇結(jié)束方法（如TritylOnAuto保留5'-DMT基團(tuán)以便后續(xù)純化）。
合成過(guò)程監(jiān)控
啟動(dòng)前運(yùn)行StartColumn步驟，檢查合成柱位置是否正確。
合成中通過(guò)電導(dǎo)流動(dòng)池監(jiān)測(cè)DMT陽(yáng)離子釋放量，判斷反應(yīng)進(jìn)度。
定期檢查溫度、壓力等參數(shù)是否在正常范圍內(nèi)。
產(chǎn)物處理
合成完成后，從固相載體上切割產(chǎn)物，采用OPC、PAGE或HPLC純化去除短片段和鹽離子。
純化后產(chǎn)物分裝保存，避免反復(fù)凍融。
二、日常維護(hù)要點(diǎn)
瓶塞“O”形環(huán)
每月檢查一次，每年至少更換一次。若出現(xiàn)白色沉淀，用乙腈棉簽清洗。
更換時(shí)用止血鉗夾取舊環(huán)，確保插塞無(wú)顆粒后安裝新環(huán)，并進(jìn)行壓力測(cè)試。
儲(chǔ)液瓶與管路
保持儲(chǔ)液瓶清潔，定期檢查氬氣壓力及管路氣密性。
合成前用新試劑清洗管路，防止舊試劑殘留干擾反應(yīng)。
流路節(jié)流閥
每月清洗一次，先在水中煮沸15分鐘，再用甲醇超聲波清洗，防止阻塞。
儀器清潔與防塵
每周用濕布擦拭外殼，避開通風(fēng)口；高靈敏度實(shí)驗(yàn)后，用紫外燈照射反應(yīng)倉(cāng)15分鐘滅菌。
長(zhǎng)期不用時(shí)，每周開機(jī)1-2次，每次約半小時(shí)，防止部件受潮。
三、常見(jiàn)故障排查
合成產(chǎn)率低
原因：試劑失效、管路泄漏、合成柱位置偏差。
解決：更換試劑，檢查管路氣密性，重新校準(zhǔn)合成柱位置。
產(chǎn)物純度不足
原因：純化方法不當(dāng)、合成步驟錯(cuò)誤。
解決：優(yōu)化純化條件（如增加HPLC純化步驟），檢查合成參數(shù)是否正確。
儀器報(bào)警或中斷
原因：廢液瓶過(guò)滿、電源波動(dòng)、溫度異常。
解決：清空廢液瓶，使用穩(wěn)壓電源，檢查溫度傳感器是否故障。
數(shù)據(jù)異常（如電導(dǎo)值波動(dòng)）
原因：電導(dǎo)池污染、試劑混入雜質(zhì)。
解決：清洗電導(dǎo)池，更換新試劑并重新校準(zhǔn)。
四、操作注意事項(xiàng)
無(wú)菌環(huán)境：引物合成對(duì)污染敏感，操作時(shí)需佩戴手套，避免外源DNA或酶污染。
試劑保存：乙腈等溶劑需避光保存，活化劑和氧化劑需密封防止受潮。
數(shù)據(jù)記錄：詳細(xì)記錄每批次合成的序列、試劑批號(hào)、質(zhì)檢圖譜，便于追溯問(wèn)題。
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