引物合成儀溶解和保存引物的方式
更新時間：2022-01-17 點擊次數：3918
引物合成儀合成步驟： 1、脫掉附加在CPG擔體上的第一個堿基5' -OH基團上的保護基 (DMTr)，準備附加下一個新的堿基；
2、活化新的堿基單體，準備與第一個堿基進行反應；
3、第二個堿基與第一個堿基發生偶聯反應；
4、將沒有反應的第一個堿基的5' -OH加帽封死 ，使其不再進一步參與反應；
5、將核苷亞磷酸酯氧化成更穩定的核苷磷酸酯 (即將三價磷氧化成五價磷)。
6、重復進行1～5的循環，直至合成完所需的Oligo DNA序列。
7、合成結束后，將Oligo DNA分子從CPG上切下，再進行進一步的純化。
引物合成儀溶解和保存引物的方式：
干燥后的引物質地非常疏松，開蓋前最好離心一下，或管垂直向上在桌面上敲敲，將引物粉末收集到管底。根據計算出的體積加入去離子無菌水或 10mM Tris pH7.5 緩沖液，室溫放置幾分鐘，振蕩助溶，離心將溶液收集到管底。溶解引物用的水一般不要用蒸餾水，因為有些蒸餾水的 pH 值比較低（ pH4-5 ） , 引物在這種條件下不穩定。
引物合成后，經過一系列處理和純化步驟，旋轉干燥而成片狀物質。引物在溶解前，室溫狀態下可以長期保存。溶解后的引物 -20 度可以長期保存。如果對實驗的重復性要求較高，合成的 OD 數較大，建議分裝，避免反復凍融。修飾熒光引物需要避光保存。
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